تشخیص مولکولی غیر کشنده باکتری Streptococcus agalactiae در ماهی قزل آلای رنگین کمان (Oncorhynchus mykiss)

نوع مقاله: مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 دانش‌آموخته کارشناسی ارشد گروه شیلات، دانشکده منابع طبیعی، دانشگاه تهران، کرج، ایران.

2 استاد، گروه شیلات، دانشکده منابع طبیعی، دانشگاه تهران، کرج، ایران.

3 دانشیار، گروه شیلات، دانشکده منابع طبیعی، دانشگاه تهران، کرج، ایران.

چکیده

بیماری استرپتوکوکوزیس به­دلیل شیوع سریع به ­ویژه در فصل تابستان، مرگ و میر نسبتاً بالا، کاهش تولید و خسارات اقتصادی به آبزی­ پروری یکی از مهمترین بیماری­ های باکتریایی در ماهیان سردآبی است. تشخیص به ­موقع بیماری در پیشگیری از همه­ گیری و اقدامات درمانی بسیار ضروری می­ باشد. نمونه برداری به­ صورت Non-destructive  از خون و موکوس ماهی یکی از بهترین روش­ های تشخیصی می­ باشد که بدون نیاز به تلف کردن ماهی بیماری تشخیص داده می­ شود. در این بررسی شناسایی باکتری استرپتوکوکوس آگالاکتیه در ماهی قزل­ الای رنگین کمان انجام شده است که با وجود بیماری­ زایی بالای این باکتری، کمتر مورد بررسی قرار گرفته است. برای این بررسی از خون و موکوس ماهیان قزل آلای رنگین کمان برداشت گردید و تشخیص مولکولی توسط پی سی آر انجام گردید. در بررسی مولکولیDNA موکوس و خون به­ طور مستقیم استخراج و وارد چرخه پی­ سی­ آر گردید. برای PCR از پرایمر طراحی شده بر پایه ژن scpB استفاده گردید که برای این جنس اختصاصی می­ باشد و از حساسیت بالایی برای تشخیص این گونه برخوردار است. نتایج نشان داد که در خون ماهیان قبل از بروز علائم بیماری می­ توان با استفاده از روش مولکولی باکتری را تشخیص داد اما در موکوس ماهیان باکتری مورد نظر یافت نشد. می­ توان با استفاده از این روش بیماری باکتریایی در حال گسترش در ماهیان مولد و ماهیان ارزشمند را بدون نیاز به تلف کردن ماهی تشخیص داد و به درمان آن پرداخت.

کلیدواژه‌ها

موضوعات


عنوان مقاله [English]

Non-destructive Molecular Detection of Streptococcus agalactiae in Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss)

نویسندگان [English]

  • Mehrnoosh Farid 1
  • Alireza Mirvaghefi 2
  • Hamid Farahmand 2
  • Mohammad Ali Nematollahi 3
1 M.Sc. Graduate, Department of Fisheries, Faculty of Natural Resources, University of Tehran, Karaj, Iran.
2 Professor, Department of Fisheries, Faculty of Natural Resources, University of Tehran, Karaj, Iran.
3 Associate professor, Department of Fisheries, Faculty of Natural Resources, University of Tehran, Karaj, Iran.
چکیده [English]

The objective of this study was to evaluate a non-lethal sampling technique to detect Streptococcus agalactiae, the bacterial pathogen causing Streptococcosis, in the blood and mucus of the infected rainbow trout, Oncorhynchus mykiss. Detection was established by PCR protocol based on the scpB gene. Also biochemical identification method was set by API strepsystem and conventional bacteriological tests. The fish were infected by intraperitoneally (i.p.) with 8×107 CFU/ml colony forming units of S. agalactiae. The PCR and biochemical method were positive for the blood samples from 3th and 4th days after exposure up to the end of the experiment while the fish look healthy. Mucus samples in PCR assay and biochemical methods were not positive until the end of the experiment. All any biochemically positive results were positive in PCR protocol, but some PCR positive results were negative in biochemical method. PCR Sensitivity tests were done in fish tissues seeded with serial dilutions of pure culture of S. agalactiae. Mucus was not efficient when the bacteria count is low. This study revealed that a nonlethal blood sampling can be used with high efficiency primers for PCR protocol to detect Sagalactiae in asymptomatic fish.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Molecular diagnostic method
  • PCR
  • Mucus
  • Blood
  • diseases